二級生物安全實(shí)驗室的選址
1 就選址而言，盡管二級生物安全實(shí)驗室沒(méi)有特殊的要求，但是從生物安全角度講該實(shí)驗室所處的位置比較理想。
主實(shí)驗室技術(shù)參數：
1、潔凈度8級 Cleanliness Class 8
大于等于0.5μm的塵粒數大于352000粒/m3（352粒/L）到小于等于352000粒/m3(3520粒/L),大于等于3μm的塵粒數大于3000粒/m3(3粒/L)到小于等于30000粒/m3(30粒/L)。
2、照度：最低≥300Lx,
3、噪聲：≤60dB
4、相對濕度：30%~65%
5、溫度：18-25℃
6、壓差：-10Pa
7、氣流方向：?jiǎn)蜗嗔?，從清潔區流向污染區
8、墻面、吊頂：彩鋼板：鋼板厚度0.426，15克覆膜
9、鋁合金：門(mén)窗用電泳材質(zhì)，其余均采用噴塑。
10、凈化門(mén)：帶觀(guān)察窗，閉門(mén)器
11、高效送風(fēng)口：不銹鋼沖壓成型
12、地面：PVC卷材
13、洗手盆：不銹鋼材質(zhì)，內含感應水龍頭、自動(dòng)干手器
14、傳遞窗：不銹鋼機械連鎖
15、洗眼器：不銹鋼臺式
16、送風(fēng)機組：內含新風(fēng)口、新風(fēng)回風(fēng)混合段、送風(fēng)段、均流段（維修段）、中效段、出風(fēng)段、消聲段
17、排風(fēng)機組：出口有高效過(guò)濾器過(guò)濾
18、操作臺：貼面理化板
19、入口處有國際通用生物安全危險符號，同時(shí)有標明實(shí)驗室名稱(chēng)、預防措施負責人、緊急聯(lián)絡(luò )方式的有機玻璃板。在出口處有黑暗中可明確辨認的安全出口標志。
圍護結構
BSL－1實(shí)驗室
1) 無(wú)需特殊選址，普通建筑物即可，但應有防止節肢動(dòng)物和嚙
齒動(dòng)物進(jìn)入的設計。
2) 每個(gè)實(shí)驗室應設洗手池，宜設置在靠近出口處。
3) 在實(shí)驗室門(mén)口處應設掛衣裝置，個(gè)人便裝與實(shí)驗室工作服分開(kāi)放置。
4) 實(shí)驗室的墻壁、天花板和地面應平整、易清潔、不滲水、耐
化學(xué)品和消毒劑的腐蝕。地面應防滑，不得鋪設地毯。
5) 實(shí)驗臺面應防水，耐腐蝕、耐熱。
6) 實(shí)驗室中的廚柜和實(shí)驗臺應牢固。廚柜、實(shí)驗臺彼此之間應
保持一定距離，以便于清潔。
7) 實(shí)驗室如有可開(kāi)啟的窗戶(hù)，應設置紗窗。
8) 實(shí)驗室內應保證工作照明，避免不必要的反光和強光。
9) 應有適當的消毒設備。
BSL-2實(shí)驗室
1) 滿(mǎn)足BSL－1的要求。
2) 實(shí)驗室門(mén)應帶鎖并可自動(dòng)關(guān)閉。實(shí)驗室的門(mén)應有可視窗。
3) 應有足夠的存儲空間擺放物品以方便使用。在實(shí)驗室工作區
域外還應當有供長(cháng)期使用的存儲空間。
4) 在實(shí)驗室內應使用專(zhuān)門(mén)的工作服；應戴乳膠手套。
5) 在實(shí)驗室的工作區域外應有存放個(gè)人衣物的條件。
6) 在實(shí)驗室所在的建筑內應配備高壓蒸汽滅菌器，并按期檢查和驗證，以保證符合要求。
7）應在實(shí)驗室內配備生物安全柜。
8) 應設洗眼設施，必要時(shí)應有應急噴淋裝置。
9) 應通風(fēng)，如使用窗戶(hù)自然通風(fēng)，應有防蟲(chóng)紗窗。
10) 有可靠的電力供應和應急照明。必要時(shí)，重要設備如培養箱、生物安全柜、冰箱等應設備用電源。
11) 實(shí)驗室出口應有在黑暗中可明確辨認的標識。
下面分類(lèi)詳細介紹如下：
1 實(shí)驗室圍護結構采用彩鋼板材料，表面光滑、耐腐蝕、防水，所有縫隙可靠密封，便于清潔消毒，且防震、防火。
2 天花板、地板、墻壁間的交角均為圓弧形，且可靠密封。
3 地面采用PVC材料，防滲漏、無(wú)接縫、光潔、防滑
4 實(shí)驗室的所有門(mén)均可自動(dòng)關(guān)閉。
5 實(shí)驗臺面采用理化板，防水、耐腐蝕、耐熱。
6 所有入口處均能防止節肢動(dòng)物和嚙齒動(dòng)物進(jìn)入。
7 實(shí)驗室出口有在黑暗中可明確辨認的標識。
平面結構與分區
1 分區：分為清潔區、半污染區和污染區
1.1 清潔區：用于實(shí)驗人員辦公活動(dòng)、休息的區域。
1.2 半污染區：即緩沖走廊，用于標本的傳送、廢物的輸出、進(jìn)入更衣室，
1.3 污染區：是實(shí)驗室的核心區域，用于實(shí)驗操作。
2 設置：包括配電箱、空調、更衣柜、II級生物安全柜、實(shí)驗臺、洗手池、洗眼器、傳遞窗等。
實(shí)驗室消毒隔離要求
1 要求
1.1 實(shí)驗室相對獨立，通過(guò)隔離門(mén)與公共部位相隔。實(shí)驗核心區應包括實(shí)驗室間及與相連的緩沖走廊，明確劃分為清潔區、半污染區和污染區。
1.2 實(shí)驗室內所有物品應專(zhuān)用，需帶出時(shí)必須嚴格消毒。
1.3 實(shí)驗室工作人員進(jìn)入實(shí)驗室應穿戴好個(gè)人防護用品
1.4 培養基、組織、體液等必須放入防漏密閉的容器內儲運。
1.5 血清學(xué)試驗、致病菌檢測、樣品處理及分裝應在II級生物安全柜內進(jìn)行。
1.6 樣本離心時(shí)，離心機應放在排毒柜內或生物安全柜內進(jìn)行，以防產(chǎn)生氣溶膠或濺出。
1.7 實(shí)驗過(guò)程中使用的器材、實(shí)驗廢棄物均應按規定進(jìn)行消毒、滅菌處理。
1.8 實(shí)驗完畢，先消毒物體表面，再按規定程序脫下個(gè)人防護用品，并進(jìn)行空氣消毒。
1.9 離開(kāi)實(shí)驗室前，必須按有關(guān)規定清潔消毒雙手。
1.10 儀器設備運出實(shí)驗室前必須按有關(guān)規定進(jìn)行嚴格消毒。
2 消毒方法
2.1 實(shí)驗室內空氣消毒
2.1.1 可使用送排風(fēng)系統加強通風(fēng)。
2.1.2 紫外線(xiàn)燈管、燈車(chē)適用于無(wú)人室內空氣、物體表面的消毒。常用的室內懸吊式紫外線(xiàn)燈對室內空氣消毒時(shí)安裝的數量為平均1.5W/m3（照射強度≥70MW/cm2），照射時(shí)間不少于60分鐘。
2.2 實(shí)驗室表面消毒
2.2.1 地面
實(shí)驗室地面要濕式拖掃，禁止干拖干掃。需消毒時(shí)，可用有效氯為500-1000mg/L的含氯消毒液噴灑或拖地，消毒液用量不小于100ml/m3。污染區和清潔區拖把應專(zhuān)用，不得混用。使用后，用上述消毒液浸泡30分鐘，再用水清洗干凈，懸掛晾干，最好在陽(yáng)光下曬干后備用。
2.2.2 物體表面的消毒
實(shí)驗臺、桌、椅、凳、門(mén)把手等可用有效氯為500-1000mg/l的含氯消毒液噴灑或擦拭，并作用10-15分鐘后及時(shí)用清水擦洗，以除去殘留的消毒液。
2.2.3 手的消毒
實(shí)驗室工作完畢后應立即進(jìn)行手的清洗和消毒。采用感應式自動(dòng)洗手設備，使用瓶裝式液體皂，洗手后可用一次紙巾擦拭，最好用烘干機烘干。離開(kāi)實(shí)驗室前，脫掉工作服后，應進(jìn)行手的清洗。
2.2.4 病原微生物實(shí)驗污水消毒
按GB(8466-2001《醫療機構污水排放要求》執行。
清潔管理制度
1 實(shí)驗室清潔的原則
實(shí)驗室的清潔工作要在保證生物安全的前提下進(jìn)行，符合生物安全防護的要求，遵守先消毒后清潔的原則。一般情況下，生物安全實(shí)驗室應由專(zhuān)門(mén)人員進(jìn)行消毒，但每名實(shí)驗室工作人員都有責任做好實(shí)驗室清潔和消毒工作。
2 清潔和消毒用品
實(shí)驗室應備有必要的清潔和消毒用品，主要包括拖把、抹布或紗布、水桶、消毒液、配好的75%乙醇等。
3 消毒劑
主要是過(guò)氧乙酸、含氯消毒劑等。
4 消毒器械
主要是紫外線(xiàn)燈、紫外線(xiàn)燈車(chē)。紫外線(xiàn)的穿透能力特別弱，因此必須定時(shí)定期對紫外線(xiàn)燈進(jìn)行清潔。一般情況下每月使用浸有75%乙醇的抹布擦拭燈管一次，擦拭前，先拔掉插頭并冷卻10分鐘；還應經(jīng)常檢測紫外線(xiàn)燈的照射強度，當照射強度低于原始照射強度的70%時(shí)，就應由專(zhuān)業(yè)人員更換燈管，一般情況下每三個(gè)月檢查一次紫外線(xiàn)燈的照射強度。
5 保持實(shí)驗室環(huán)境的整潔
實(shí)驗室內禁止飲食、吸煙、會(huì )客和喧嘩。每項工作完成后，必須清潔臺面，恢復實(shí)驗室的待運行狀態(tài)。實(shí)驗室臺面和器械應在每次實(shí)驗操作完成后及時(shí)用消毒液擦拭表面。
6 實(shí)驗室地面的清潔
實(shí)驗室地面要濕式拖掃，禁止干拖干掃。需消毒時(shí)，可用0.1%過(guò)氧乙酸或有效氯為500-1000mg/l的含氯消毒液噴灑或拖地，消毒液的用量不得少于100ml/m2。污染區和清潔區拖把應專(zhuān)用 ，不得混用。使用后，用上述消毒液浸泡30分鐘，再用水清洗干凈，懸掛晾干，最好在陽(yáng)光下曬干后備用。每次實(shí)驗完畢后由工作人員使用消毒液拖地，每月徹底清洗一次。
7 實(shí)驗臺、桌、椅、凳。門(mén)把手的清潔
可用0.1%過(guò)氧乙酸拖地或有效氯為500-1000mg/l的含氯消毒液噴灑或擦拭，作用10-15分鐘后及時(shí)用清水擦洗，以除去殘留的消毒液。
8 紡織品的清潔
棉織工作服、帽子、口罩等放入專(zhuān)用的污物袋中，用70℃以上熱水加洗滌劑洗滌；有明顯病原微生物污染時(shí)，隨時(shí)噴灑消毒液消毒或放入專(zhuān)用污物袋中，進(jìn)行高壓蒸汽滅菌處理。
9 儀器設備的清潔
可用消毒液或75%乙醇擦拭表面消毒，再用中性洗滌劑和清水擦洗去污。
10 手的清洗
實(shí)驗室工作完畢后應立即進(jìn)行手的清洗和消毒。采用感應式自動(dòng)洗手設備，使用瓶裝式液體皂，洗手后可用一次紙巾擦拭，最好用烘干機烘干。離開(kāi)實(shí)驗室前，脫掉工作服后，應進(jìn)行手的清洗。
消毒隔離制度
1 及時(shí)消毒
1.1 當實(shí)驗微生物污染實(shí)驗環(huán)境時(shí)，應立即停止實(shí)驗，用有效消毒液進(jìn)行消毒處理。
1.2 實(shí)驗室被空氣和氣溶膠傳播的病原微生物污染時(shí)，應立即關(guān)閉實(shí)驗室進(jìn)行消毒處理。
1.3 可疑污染的物品帶出生物安全實(shí)驗室前，應進(jìn)行徹底滅菌或消毒處理。菌株和相關(guān)樣本應對樣本的載體和包裝容器表面進(jìn)行嚴格滅菌或消毒處理后，方可帶出，且在取出樣本時(shí)應對載體進(jìn)行再次消毒處理，對包裝容器進(jìn)行滅菌或消毒處理。
1.4 盛裝污染微生物實(shí)驗耗材的容器應有足量的消毒液，用過(guò)的耗材立即浸入消毒液中。
1.5 實(shí)驗結束后，應立即對實(shí)驗環(huán)境進(jìn)行消毒處理，如擦洗、消毒工作臺面、地面，開(kāi)啟紫外線(xiàn)燈照射1小時(shí)以上。
1.6 實(shí)驗完成后，對實(shí)驗廢棄物應立即進(jìn)行高壓滅菌或消毒等無(wú)害化處理。
1.7 實(shí)驗人員在實(shí)驗結束后應立即清洗消毒雙手，洗臉，必要時(shí)應洗澡更衣。
2 徹底消毒
2.1 對需消毒的物品應采取徹底的消毒措施，不留死角。
2.2 消毒液浸泡消毒時(shí)，要將被消毒物品全部浸泡在消毒液中，對有管腔的物品，應將消毒液灌入管腔，排除氣栓。
2.3 消毒劑擦拭消毒時(shí)，要將消毒液擦拭需要消毒物品的所有表面并保持充分作用時(shí)間。
2.4 消毒對象的選擇要根據試驗情況而定，凡可能接觸試驗微生物的實(shí)驗器材、試驗環(huán)境(包括臺面、地面、墻壁、空氣)、人員(個(gè)體及防護用品等)均應采取相應消毒處理。
3 有效消毒
3.1 要根據消毒對象和微生物的種類(lèi)選擇合適的消毒和滅菌方法。
3.1.1 對細菌芽孢、真菌孢子污染的物品，選用高水平消毒或滅菌法。對于受高抵抗力致病因子污染的器材必須用氫氧化鈉和高壓蒸汽(136℃，60分鐘)進(jìn)行消毒處理。
3.1.2 對受到分枝桿菌、真菌、親水病毒、螺旋體、支原體、衣原體等病原微生物污染的物品，選用中水平以上消毒方法。
3.1.3 對受到一般細菌繁殖體、親脂病毒等污染的物品，選用中水平或低水平消毒方法。
3.14 存在較多有機物(如血液、分泌物、排泄物)的物品消毒時(shí)，應加大消毒藥物的使用劑量和/或處長(cháng)作用時(shí)間。
3.1.5 消毒物品上微生物污染特別嚴重時(shí)，應加大消毒劑的的使用劑量和/或處長(cháng)作用時(shí)間。
3.1.6 選擇表面消毒方法，應考慮表面性質(zhì)，光滑表面可選擇紫外線(xiàn)消毒器近距離照射或消毒液擦拭，多孔材料表面可采用噴霧消毒法。
3.2 消毒器械和消毒液應有衛生許可批文。
3.2.1 消毒產(chǎn)品應在有效期內使用，應按照說(shuō)明書(shū)標示的作用濃度(或強度)、作用時(shí)間和使用方法進(jìn)行消毒操作。連續使用的消毒劑應定期測試有效成分含量并及時(shí)更換。
3.2.2 消毒、滅菌設備應定期測定消毒或滅菌效果。大型消毒、滅菌設備在正式使用前和大修后，應通過(guò)性能檢測，證明可以有效使用。
4 注意事項
4.1 要減少消毒處理對人體的傷害、對物品的破壞、對環(huán)境的影響。
4.2 根據被消毒物品的理化性狀，選擇相容性好的消毒劑。耐高溫、耐濕的物品和器材，首選高壓蒸汽滅菌；金屬、玻璃器材、油劑類(lèi)和干粉類(lèi)等可選干熱滅菌。畏熱、畏濕、畏腐蝕及貴重物品，可選環(huán)氧乙烷薰蒸消毒、滅菌。
4.3 用于人體消毒的消毒劑應選擇對人體皮膚粘膜刺激較小的消毒劑。
4.4 用于環(huán)境消毒的消毒劑，要嚴格按照消毒對象、目標污染物種類(lèi)以及污染程度，以其達到有效消毒、又不污染環(huán)境為前提，合理選擇消毒劑使用濃度和作用時(shí)間。
實(shí)驗室廢棄物管理
1 實(shí)驗后的廢棄物如不及時(shí)處置則會(huì )污染環(huán)境，從而對工作人員造成危害，因此有關(guān)人員必須嚴格按規定執行。
2 實(shí)驗樣本在處理和進(jìn)行實(shí)驗室檢測時(shí)產(chǎn)生的廢棄物，如平皿、吸頭盒、塑料試管等應放入適當的容器或嚴格防漏的高壓袋內。
3 實(shí)驗過(guò)程中產(chǎn)和生的污染性液體物質(zhì)、廢棄的液體標本、培養物等應放在盛有消毒液的嚴格防漏的專(zhuān)用容器中，并及時(shí)加蓋。
4 進(jìn)行實(shí)驗所必須使用的銳器，如一次性注射器、針頭、微量移液器吸頭、玻璃器具、手術(shù)刀片及碎玻璃，必須放入指定專(zhuān)用的堅壁容器中，加蓋密封。
5 以上所有盛有廢棄物的容器，在每次實(shí)驗完成后，應送高壓滅菌。
6 實(shí)驗室所有垃圾及用過(guò)的乳膠手套、隔離衣、口罩、一次性帽子等，裝于相應的污物袋內，經(jīng)高壓消毒處理后丟棄。
7 所有臨床標本在留驗期過(guò)后，均應高壓消毒處理后再進(jìn)行后續處理。
8 高壓鍋應有專(zhuān)人負責，嚴格按使用說(shuō)明操作，確保在121℃條件下，高壓至少30分鐘，以達到有關(guān)滅菌消毒要求。
9 所有實(shí)驗產(chǎn)生的廢棄物，必須經(jīng)嚴格高壓消毒后方能運出實(shí)驗區，并送到指定地點(diǎn)集中焚燒處理。
10 空化學(xué)制品容器
10.1 非危險性的空化學(xué)制品：依照通則消毒后，按普通廢棄物分類(lèi)處理。
10.2 危險性空化學(xué)制品：不得將危險性空化學(xué)品容器按普通廢棄物處理。根據有關(guān)危險化學(xué)制品處理辦法進(jìn)行相應無(wú)害化處理或由上級主管部門(mén)處理。
11 如果遇到本作業(yè)指導書(shū)中未提及的情況，請與實(shí)驗室安全部門(mén)聯(lián)系。
常規安全操作規程
1 禁止非工作人員進(jìn)入實(shí)驗室，參觀(guān)實(shí)驗室等特殊情況須實(shí)驗室主任批準方可進(jìn)入。
2 嚴禁在實(shí)驗室工作區飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化妝、存放食物和日常生活用品。
3 與實(shí)驗無(wú)關(guān)的物品不得帶入實(shí)驗室。
4 接觸微生物或含有微生物的物品后，要洗手；離開(kāi)實(shí)驗室前要脫掉并洗手。
5 實(shí)驗過(guò)程中，嚴格按有關(guān)操作規程操作，降低濺出和氣溶膠的產(chǎn)生。
6 每天至少消毒一次工作臺面，活性物質(zhì)濺出后要隨時(shí)消毒。
7 以移液器吸取液體，嚴禁口吸。
8 所有培養物、廢棄物在運出實(shí)驗室前必須經(jīng)可行的消毒或滅活，如高壓消毒。需運出實(shí)驗室消毒的物品應置于防滲漏的專(zhuān)用密閉容器內
9 制定尖銳器具的安全操作規程。
10 制定有效的防鼠防蟲(chóng)措施。
11 實(shí)驗室入口須貼上醒目的生物危險標志，注明危險因子、生物安全級別、實(shí)驗室負責人及其他相關(guān)負責人姓名、電話(huà)。
第二章 特殊安全操作規程
1 實(shí)驗室相對獨立，明確劃分清潔區、半污染區和污染區，三區不得交叉，人流與物流分開(kāi)。
2 進(jìn)行感染性實(shí)驗時(shí)，禁止他人進(jìn)入實(shí)驗室，或必須經(jīng)實(shí)驗室主任同意方可進(jìn)入；免疫耐受或正在使用免疫抑制劑的工作人員不得進(jìn)入實(shí)驗室，或必須經(jīng)實(shí)驗室主任同意方可進(jìn)入。
3 工作人員應接受必要的免疫接種和檢測（如乙型肝炎疫苗、卡介苗等）。
4 必要時(shí)收集從事危險性工作人員的基本血清留底，并根據需要定期收集血清樣本，檢測并出具報告，如有問(wèn)題及時(shí)解決。
5 實(shí)驗室主任應制定規章制度和生物安全程序，并納入生物安全手冊，由實(shí)驗室負責人專(zhuān)門(mén)保管，工作人員在進(jìn)入實(shí)驗室前要閱讀并在工作中遵照執行；其他人員須告知其潛在風(fēng)險并符合進(jìn)入實(shí)驗室要求，經(jīng)實(shí)驗室主任允許方可進(jìn)入。
6 工作人員須接受有關(guān)的潛在危險知識的培訓，掌握預防暴露及暴露后的消毒處理程序；每年要接受一次最新的培訓。
7 除特殊情況，禁止在實(shí)驗室使用銳器，盡可能使用塑料器材代替玻璃器材，必須使用時(shí)應嚴格遵守銳器安全操作規程。
8 培養基、組織、體液及其他具有潛在危險性的廢棄物須按廢棄物處理制度處理。
9人員暴露于感染性物質(zhì)時(shí)，應及時(shí)向實(shí)驗室負責人匯報，并記錄事故經(jīng)過(guò)和處理方案。
10 禁止將無(wú)關(guān)動(dòng)物帶入實(shí)驗室。
11 實(shí)驗過(guò)程中應使用驗收合格的二級生物安全柜。
12 實(shí)驗設備在運出修理或維修前必須嚴格消毒。
